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刊号:ISSN 1000-7083
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陕北白绒山羊体细胞手工核移植研究
Artificial Somatic Cell Nuclear Transfer of Shaanbei White Cashmere Goat
于鸿浩1,2,闫海龙1,2,敬晓琪1,2,胡军和1,2,冯平1,2,屈雷1,2*
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DOI:
作者单位:(1. 榆林学院生命科学研究中心,陕西榆林719000;2. 陕西省绒山羊工程技术研究中心,陕西榆林719000)
中文关键字:核移植;手工克隆;山羊;去核;融合
英文关键字:nuclear transfer; handmade cloning; goat; denucleation; fusion
中文摘要:

手工核移植是不依赖于显微操作仪的核移植方法,卵母细胞去核以及去核卵母细胞与供体细胞融合是其技术难点。本研究优化了山羊卵母细胞手工去核方法,优化后的卵母细胞复圆率为83.45%±3.2%,去核率为98.61%±1.9%;建立了去核卵母细胞与供体细胞化学辅助融合方法,融合率为89.05%±4.33%。利用优化后的去核方法和化学辅助融合法制备了山羊克隆胚,克隆胚卵裂率为83.45%±2.47%,囊胚发育率为23.4%±5.83%。本研究建立了基于手工核移植技术的山羊体细胞克隆技术体系。

英文摘要:

Artificial nuclear transfer is a type of micromanipulator-independent nuclear transfer method. Oocyte denucleation and fusion of enucleated oocyte and donor somatic cell are the technological difficulty of artificial nuclear transfer. In this study, the artificial denucleation method of goat oocyte was optimized and the orbicular rate and enucleated rate of enucleated oocyte were 83.45%±3.2% and 98.61%±1.9%, respectively. The enucleated oocyte and donor somatic cell was fused by chemical assistant fusion method, and the fusion rate was 89.05%±4.33%. Cloned embryos were reconstructed using the optimized method above, and the cleavage rate and blastocyst rate were 83.45%±2.47% and 23.4%±5.83%, respectively. In conclusion, the denucleation method of oocyte was optimized and the chemical assistant fusion method was constructed in this study, thus the goat somatic cell cloning technique system was successfully established on the basis of handmade nuclear transfer.

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