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家鸡GPR15基因的克隆、功能分析及组织表达图谱探究
Characterization of GPR15 in Chickens: Cloning, Tissue distribution and Functional analysis
方超,李枭虓,张剑南,陈军安,李娟,王亚军
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DOI:
作者单位:四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室
中文关键字:家鸡;GPR15;功能分析;组织表达图谱
英文关键字:Chicken; GPR15; Functional analysis; Tissue expression pattern
中文摘要:孤儿受体G蛋白偶联受体15(GPR15)被报道在哺乳动物肠道稳态以及炎症反应中介导重要生理效应。本文以家鸡结肠来源的cDNA为模板,首次克隆家鸡GPR15基因的cDNA全长。家鸡GPR15编码区cDNA长度为1107bp,由1个外显子组成,编码368个氨基酸的前体蛋白;氨基酸序列分析表明,家鸡GPR15是具有经典七次跨膜结构的G蛋白偶联受体(GPCR);共线性分析表明,家鸡GPR15与斑胸草雀(Taeniopygia guttata)、中华龟(Chinemys reevesii)、蜥蜴(Anolis carolinensis)和人(Homo sapiens)的GPR15是直系同源基因;基于荧光素酶报告系统,针对家鸡GPR15的功能分析表明,家鸡APJ受体的内源性配体Apelin和Apela都未能在CHO细胞中激活家鸡GPR15受体;同时,实时定量PCR检测发现:家鸡GPR15高表达于脾脏组织,在盲肠、肺中有一定量的表达,在其他组织仅有微弱的表达。以上结果为探究家鸡GPR15的功能特征及其在家鸡中的生理功能奠定基础。
英文摘要:In this study, the cDNA sequence of chicken GPR15 was cloned using the cDNA derived from the chicken's colon. The sequence length of cDNA coding region of chicken GPR15 is 1107bp, which consists of 1 exon and encodes a protein containing 368 amino acids. Amino acid sequence analysis showed that chicken GPR15 has a classical seven-transmembrane structure of GPCR. Synteny analysis showed that GPR15 of chicken is the orthologous gene of GPR15 of zebra finch, Chinese turtle, lizard, and human GPR15; Monitored by the pGL3-CRE-luciferase reporter system and pGL4-SRE- luciferase reporter system, GPR15 can’t be activated by the endogenic ligand of chicken APJ (Apelin and Apela) in CHO cells. The tissue expression pattern showed that chicken GPR15 is highly expressed in the spleen, and there is a certain amount of expression of GPR15 in caecum and lung. These results laid a foundation for exploring the functional properties of GPR15 and the physiological functions of GPR15 in chickens.
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