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家鸡似G蛋白偶联受体119基因的克隆与组织表达分析
Molecular Cloning and Tissue Expression of Chicken GPR119-like Receptor Gene
邓秋洋,张剑南,王亚军,李娟
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DOI:
作者单位:四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610065
中文关键字:家鸡;GPR119b;分子克隆;组织表达
英文关键字:chicken; GPR119b; molecular cloning; tissue expression
中文摘要:家鸡G蛋白偶联受体119(GPR119)A型视紫红质G蛋白偶联受体家族成员。在哺乳类动物中,该基因高表达于胰腺β细胞和PP细胞以及小肠组织的内分泌L细胞,参与胰岛素释放调节。本文以家鸡小肠cDNA为模板,首次克隆到似GPR119新基因,本研究将其命名为GPR119b基因。结果显示:家鸡GPR119b基因的cDNA全长954 bp,编码具317个氨基酸的前体蛋白。将家鸡GPR119b前体蛋白氨基酸序列与绿头鸭、绿海龟、西部锦龟和火鸡的GPR119b进行序列比对,分析显示其分别具有79.9%61.0%62.3%95.5%的相似度。利用RT-PCRRACE技术,家鸡GPR119b5’UTR亦获分离,该片段678 bp。采用Real-time PCR方法,本研究亦探究家鸡GPR119b基因的组织表达,发现家鸡GPR119b基因在大脑、肝脏、肾脏、小肠、卵巢、精巢、垂体、胰腺、皮肤、脂肪、肺、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、直肠等组织中有表达,其中GPR119b基因在肝脏、肾脏、盲肠和精巢的表达量较高,在胰腺、皮肤、脂肪和肺组织中,GPR119b基因仅有微量表达。本研究为进一步探究GPR119b基因在家鸡中的生理功能奠定基础。
英文摘要:

G protein-coupled receptor 119 (GPR119) is a member of class A (rhodopsin-type) G protein-coupled receptor family. In mammals, GPR119 gene is found to be highly expressed in pancreatic islet β cells, PP cells and intestine endocrine L cells involving in insulin secretion. In this study, we cloned a chicken GPR119-like gene (named cGPR119b) from intestine and examined its expression in chicken tissues. The results showed that the full-length cDNA of cGPR119b was 954 bp in length and encode a precursor protein of 317 amino acids. Sequence analysis revealed that chicken GPR119b shares high amino acid sequence identity with that of Anas platyrhynchos (79.9%), Chelonia mydas (61.0%), Chrysemys picta bellii (62.3%), Meleagris gallopavo (95.5%).5’-RACE PCR assay revealed that the5’UTR of chicken GPR119b is 678 bp. Quantitative real-time PCR assay showed that cGPR119b was widely expressed in various chicken tissues including the brain, liver, kidney, intestine, ovary, testis, pituitary, pancreas, skin, fat, lung, duodenum, jejunum, ileum, cecum and rectum. GPR119b is highly expressed in the liver, kidneys, cecum and testes and weakly expressed in the pancreas, skin, fat and lung. Present study provided a basis to uncover the physiological roles of GPR119b in chickens.

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